INFORME SOBRE PRACTICA DE LABORATORIO DEL POLITECNICO JAIME IZASA CADAVID.
El día 28 de agosto. Asistimos a la práctica de laboratorio programada por la ingeniera Mónica Gómez, con el fin de realizar un reconocimiento general de lo que es un laboratorio de micro propagación y sanidad vegetal. Para lo cual contamos con la asesoría de la ingeniera Mónica obregón.
El reconocimiento lo iniciamos por:
Vidriería que se utiliza.
Erlenmeyer: que se utiliza para medir, mezclar volúmenes
Beacker o vaso de precipitado: sirve para medir o traspasar sustancias de un lado a otro.
Tubos de ensayo: sirven para tomar muestras de tejidos, hongos o bacterias.
Probetas: sirven para medir volúmenes.
Pipetas: se utilizan para traspasar soluciones liquidas.
Mechero: se utiliza para calentar soluciones, crear ambientes de altas temperaturas y eliminar patógenos.
Mortero: se utiliza para macerar.
Cajas de petri: se utilizan para cultivar meristemos, hongos, bacterias.
Embudo: se utiliza para evitar derrames de sustancias liquidas.
Frasco lavador: se utiliza para lavar tubos delgados como los de ensayo.
Atomizador o spray: se utiliza para producir pequeñas gotas.
Porta objetos: se utiliza para colocar muestras y llevarlas al microscopio.
Cubre objeto: se utiliza para cubrir las muestras y observarlas con más facilidad.
Frasco de vidrio: para depositar los medios de cultivos.
Materiales utilizados.
Papel aluminio: se utiliza para cubrir el material que se desea propagar.
Papel binipel o cristapel: se utiliza para sellar el material a propagar evitando que se contamine.
Algodón: se utiliza para desinfectar espacios pequeños.
Cinta indicadora: se utiliza para indicar que los materiales han sido sometidos a altas temperaturas y que están estériles.
Gaza: se utiliza para realizar tapones y desinfectar.
Papel periódico: se utiliza para envolver los materiales que van a ser esterilizados.
Accesorios utilizados.
Espátula: se utiliza para realizar mezclas y extraer sustancias solidas.
Cuchillos: se utiliza para cortar el material vegetal.
Pinzas: se utiliza para agarrar el material a propagar.
Bisturí: se utiliza para realizar cortes finos se utiliza para
Tijera: se utiliza para cortar
Asa: se utiliza para trasportar bacterias.
Punta de asa: se utiliza para trasportar muestras de hongos.
Jeringa: se utiliza para inyectar, medir, tomar muestras.
Cepillo lavador: se utiliza para lavar recipientes de vidrios delgados y largos.
Insumos utilizados.
Alcohol al 70%: se utiliza para desinfectar.
Alcohol al 95%: se utiliza como combustible para los mecheros.
Agar: es un extracto de algas rico en nutrientes y es utilizado como medio de cultivo, en cantidades de 28 gr/litro de agua.
Glucosa: se utiliza para enriquecer el medio de cultivo.
Auxinas: la mayor concentración se encuentra en los tejidos meristematicos.
Ácidos giberilicos: par enraizamiento y germinación de semillas.
Macro nutrientes: son los elementos mayores.
Micro nutriente: son los elementos menores.
Equipos utilizados.
Plancha calentadora: se utiliza para calentar sustancias.
Auto clave: se utiliza para esterilizar los materiales a utilizar.
Balanza electrónica: se utiliza para pesar cantidades exactas
Licuadora: se utiliza para preparar extractos vegetales.
Mini pipeta: se utiliza para medir en micro litros.
Peachimetro: se utiliza para medir el pH de las sustancias.
Nevera: se utiliza para conservar muestras.
Microscopio: se utiliza para observar micro organismos.
Macroscópico o estereoscopio: se utiliza para observar organismos más grandes.
Cámara de flujo laminar: se utiliza para prepara el material a propagar.
Micro propagación
Es el conjunto de técnicas y métodos de cultivo de tejidos utilizados para multiplicar plantas asexualmente en forma rápida, eficiente y en grandes cantidades.
La micro propagación: se utiliza para multiplicar o propagar plantas nuevas, tales como aquellas creadas por ingeniería genética, muta génesis o mejoramiento genético. Se utiliza también la micro propagación para obtener plantas libres de enfermedades (tales como virosis) u obtener grandes cantidades de plantas que no se propagan eficientemente.
Dentro del proceso de micro propagación se pueden diferenciar varias fases o etapas:
Preparación de la planta madre
Para poder establecer el cultivo en condiciones de asepsia, se deben obtener explantos con un nivel nutricional y un grado de desarrollo adecuado. Para obtener estos explantos es recomendable mantener a las plantas madre, es decir la planta donante de yemas, durante un período que puede oscilar entre unas semanas o varios meses en un invernadero bajo condiciones controladas. En ese ambiente se cultiva la planta en condiciones sanitarias óptimas y con un control de la nutrición y riego adecuados para permitir un crecimiento vigoroso y libre de enfermedades.
Desinfección de las yemas de la planta y/o desinfección de semillas.
Una vez elegida la planta madre, se extraerán los fragmentos a partir de los cuales se obtendrán los explantos. Los explantos pueden ser yemas, trozos de hojas, porciones de raíces o semillas. Antes de extraer los explantos se hará una desinfección de los fragmentos de planta madre para eliminar los contaminantes externos. Los contaminantes más comunes son los hongos y las bacterias que habitan en forma natural en el ambiente. Una vez desinfectado el material vegetal, se debe mantener en condiciones de asepsia. A efectos de obtener tales condiciones, se trabaja en cabinas de flujo laminar para extraer los explantos a partir del material vegetal. Estos explantes se introducirán en un tubo de cultivo conteniendo medio de cultivo para poder controlar la sanidad y la viabilidad, luego de realizar la desinfección del material con hipoclorito de sodio (agua clorada comercial), pura o diluida durante un período de 5 a 15 minutos, seguido por 3 a 4 enjuagues en agua esterilizada.
Introducción del material seleccionado in vitro.
Luego de la desinfección superficial, las semillas o las yemas dependiendo del material seleccionado, se ponen en medio de cultivo estéril. En un período de una semana o quince días, comienza el proceso de germinación o regeneración de nuevos tejidos vegetales, iniciando el ciclo de cultivo in vitro.
Multiplicación de brotes.
Durante esta fase se espera que los explantes que sobrevivieron las fases anteriores originen brotes (de procedencia axilar o adventicia) con varias hojas. En la base de cada hoja hay una yema que se desarrollará luego de ser puesta en contacto con el medio de cultivo. Periódicamente estos nuevos brotes se deben subcultivar en un nuevo medio mediante divisiones y resiembras en tubos de cultivo u otros recipientes adecuados. Estas operaciones se realizan en la cámara de flujo laminar o en un lugar aislado que nos permita mantener las condiciones de asepsia. De esta forma aumenta el número de plantas en cada repique o división de las plantas. El número de plantas que se obtiene dependerá de la especie vegetal y de las condiciones del medio de cultivo. El número de plantas que se obtiene por la vía de la micropropagación permite alcanzar incrementos exponenciales, considerando que todos los factores que afectan el crecimiento hayan sido optimizados
Enraizamiento.
Para enraizar los explantos se utilizan principalmente plantines individuales de un tamaño aproximado de 2 cm. Los brotes obtenidos durante la fase de multiplicación se transfieren a un medio libre de reguladores de crecimiento o que solo contenga hormonas del tipo de las auxinas. Algunas especies de plantas no necesitan pasar por esta etapa y emiten sus raíces en el mismo medio de cultivo donde desarrollan yemas nuevas, por lo tanto el proceso de multiplicación y enraizamiento transcurren en forma simultánea.
Aclimatación.
Los explantos recién enraizados son muy sensibles a los cambios ambientales, de manera que el éxito o el fracaso de todo el proceso depende de la aclimatación. En esta etapa las plantas sufrirán cambios de diferente tipo que permitirán la adaptación de las mismas a vivir en condiciones naturales.
Características de las plantas monocotiledoneas.
Las monocotiledóneas son plantas angiospermas que poseen una sola hoja embrionaria o cotiledón en sus semillas.
La raíz es del tipo fasciculado y de corta duración.
El tallo no suele ser ramificado, no tiene cambium vascular de crecimiento en grosor, pero algunas especies crecen en espesor por otros medios.
En las plantas herbáceas, el tallo es hueco.
Las hojas suelen ser envainadoras de tallo y paralelinervias, o sea, con nervaduras paralelas.
La flor de las monocotiledóneas suelen ser casi siempre con tres elementos florales o múltiplo de tres.
En algunas especies están muy modificados.
Existen más de 50.000 especies de monocotiledóneas.
PRESENTADO POR: caridad ballesteros y ever feria
